2  Configuração e Descrição do Conjunto de Dados

2.1 Conjunto de Dados

Os dados utilizados nestas análises provêm do BioProject PRJNA1120019. Este estudo investiga os mecanismos pelos quais o antibiótico vancomicina afeta a resposta imune antifúngica em macrófagos.

2.1.1 Descrição do Experimento

  • Organismo: Mus musculus (Macrófagos derivados da medula óssea - BMDMs)
  • Patógeno: Candida albicans (cepa SC5413)
  • Tratamento: Vancomicina vs. Não tratado (Controle)
  • Ponto Temporal: 2 horas pós-infecção

O desenho experimental envolveu a diferenciação de macrófagos na presença ou ausência de vancomicina, seguida de infecção por Candida albicans.

2.1.2 Estrutura de Lotes (Batches)

O experimento foi conduzido em 6 lotes independentes (experiment_group 1 a 6). Cada lote contém: 4 tratadas com vancomicina e 4 controles (não tratada). Essa replicação em lotes é importante porque variações técnicas entre dias de cultivo, preparo de reagentes ou extração de RNA podem introduzir diferenças que não são biológicas. Na etapa de Análise de Expressão Diferencial, veremos como levar esses lotes em consideração no modelo estatístico para não confundir efeito de batch com efeito do tratamento.

2.1.3 Seleção de Amostras

Para as análises realizadas ao longo deste curso, selecionamos especificamente as amostras estimuladas com Candida albicans. É importante notar que cada amostra biológica pode conter múltiplos arquivos de sequenciamento (Run SRR), os quais devem ser combinados para a análise final.

A tabela abaixo apresenta as amostras consideradas, extraídas do arquivo @data/SraRunTable.csv:

Run stimulus treatment cell_type
SRR29279085 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279093 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279101 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279109 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279117 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279125 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279133 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279141 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279149 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279157 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279165 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279173 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279086 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279087 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279088 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279094 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279095 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279096 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279102 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279103 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279104 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279110 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279111 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279112 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279118 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279119 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279120 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279126 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279127 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279128 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279134 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279135 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279136 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279142 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279143 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279144 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279150 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279151 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279152 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279158 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279159 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279160 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279166 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279167 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279168 Candida albicans Vancomycin Bone-marrow Macrophage
SRR29279174 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279175 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage
SRR29279176 Candida albicans Untreated (control) Bone-marrow Macrophage

Nosso interesse aqui será ver a expressão de Candida albicans frente a exposição de vancomicina, em macrófagos.